12天可以用來(lái)做什么
中國(guó)科學(xué)家用12天的時(shí)間，研發(fā)制備了H7N9全病毒滅活疫苗。
4月8日至20日，呼吸疾病國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室研究人員在全球共享禽流感數(shù)據(jù)倡議組織（GISAID）獲得H7N9病毒基因信息后，他們通過基因合成及利用反向遺傳病毒拯救技術(shù)，在短短的12天里，就獲得了供動(dòng)物實(shí)驗(yàn)用的H7N9重組病毒疫苗株（AH-H7N9-PR8），制備了研究用滅活全病毒疫苗。
疫苗迫在眉睫
呼吸疾病國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室常務(wù)副主任陳凌向《中國(guó)科學(xué)報(bào)》記者介紹，目前，對(duì)抗流感病毒最主要的“三板斧”—奧司他韋、扎那米韋和帕那米韋都是通過抑制流感病毒的神經(jīng)氨酸酶來(lái)控制病毒。使用達(dá)菲的最佳時(shí)間是發(fā)病后48小時(shí)之內(nèi)。然而絕大多數(shù)流感患者確診時(shí)已發(fā)病多日，臨床上也觀察到許多病人用藥后的病毒載量仍居高不下。
2013年，復(fù)旦大學(xué)研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)H7N9病毒對(duì)達(dá)菲已出現(xiàn)基因突變和耐藥趨勢(shì)。
達(dá)菲的有效性也存在爭(zhēng)議。2014年4月，非營(yíng)利性國(guó)際循證醫(yī)學(xué)協(xié)作組研究人員在分析20項(xiàng)達(dá)菲的實(shí)驗(yàn)后，得出無(wú)證據(jù)支持達(dá)菲具有防止流感病毒傳播或降低患者住院率和并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)作用的結(jié)論。該報(bào)告對(duì)世界上許多國(guó)家儲(chǔ)備達(dá)菲以預(yù)防流感大流行的做法提出了質(zhì)疑。
“作為臨床學(xué)科的國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新發(fā)突發(fā)傳染病出現(xiàn)后，最緊要的是應(yīng)急救治，降低死亡率?！标惲杞榻B說。呼吸疾病國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室正致力于該方面研究。該實(shí)驗(yàn)室是在中國(guó)工程院院士鐘南山的倡議下，為適應(yīng)呼吸疾病研究的發(fā)展趨勢(shì)，由廣州醫(yī)科大學(xué)和中國(guó)科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院聯(lián)合共建的。
2005年，國(guó)內(nèi)發(fā)生了數(shù)起人感染H5N1禽流感的病例，多數(shù)病人最終死亡。但深圳有一例重癥患者在接受了早前一位康復(fù)者的血漿后得以痊愈。
“毫無(wú)疑問，疫苗接種是預(yù)防流感病毒感染的最有效手段，前提是發(fā)生了大規(guī)模的人傳人感染?！标惲枵f過。
“雖然以往疫苗企業(yè)生產(chǎn)人用流感疫苗的病毒株都是由WHO（世界衛(wèi)生組織）提供。我們?nèi)杂斜匾M早知道H7N9疫苗是否能有效誘導(dǎo)產(chǎn)生抗病毒抗體。”陳凌說。團(tuán)隊(duì)的研究表明，全病毒滅活疫苗在小鼠和獼猴中可誘導(dǎo)高滴度的抗H7N9中和抗體；通過添加氫氧化鋁佐劑或者進(jìn)行二次免疫，極低劑量的疫苗也可誘導(dǎo)高滴度的中和抗體。
在中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物研究所秦川教授團(tuán)隊(duì)的協(xié)助下，研究人員在P3生物安全動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室里先給實(shí)驗(yàn)小鼠注射了由H7N9疫苗免疫小鼠和獼猴制備的抗血清，然后再用致死劑量的H7N9病毒攻擊。結(jié)果顯示，滅活重組全病毒疫苗可產(chǎn)生有效的免疫保護(hù)，同時(shí)也提示H7N9疫苗免疫者或康復(fù)者個(gè)體的血漿可以用于預(yù)防H7N9感染或治療H7N9感染患者的可行性。
“除非H7N9流感病毒出現(xiàn)嚴(yán)重的人傳人，大量生產(chǎn)及使用H7N9疫苗的可能性很低。我們開展的疫苗研究一方面證實(shí)了我們具備了技術(shù)能力，另一方面主要是用制備的疫苗株用來(lái)免疫馬匹或獼猴來(lái)制備抗病毒血清制品?！标惲枵f。
“流感病毒患者康復(fù)后的幾個(gè)月內(nèi)血液中含有較高的抗病毒中和抗體，所以如果將其血漿輸給另一位病人可以迅速中和病人體內(nèi)的病毒，從而幫助病人戰(zhàn)勝病魔?！彪m然如此，但陳凌知道禽流感的康復(fù)者有限，一方面不一定愿意捐獻(xiàn)血漿，另一方面也要符合不是肝炎病毒及其他病毒攜帶者的條件。這給疫苗制備造成了現(xiàn)實(shí)困境。
未來(lái)可期
有沒有辦法在短時(shí)間內(nèi)獲得可以用于應(yīng)急治療的抗病毒抗體呢？研究人員把目光轉(zhuǎn)向了體型龐大的馬。它可以提供上萬(wàn)毫升血液而不影響其健康，而且馬抗血清制品具有悠久的生產(chǎn)及使用歷史。
從2013年4月起，呼吸疾病國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室與中國(guó)軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所開展了協(xié)作。在鐘南山和夏咸柱兩位中國(guó)工程院院士的大力支持下，科研人員立即在東北的馬場(chǎng)用自己制備的滅活重組H7N9病毒疫苗免疫了數(shù)匹馬。經(jīng)測(cè)試，幾次加強(qiáng)免疫后的馬匹產(chǎn)生了效價(jià)過萬(wàn)的抗病毒抗體，而在H7N9 感染康復(fù)者血清測(cè)到的抗體效價(jià)通常僅有幾百。科研人員從這些馬匹提取了幾萬(wàn)毫升血清。然而，馬血清含有各種對(duì)人體而言的異體蛋白，具有高致敏性而不能被直接用于治療病人?？蒲腥藛T將馬血清經(jīng)過一系列步驟提純出抗體免疫球蛋白，然后把與致敏最有關(guān)的Fc片段去除，這樣就大大降低了致敏性?？蒲腥藛T按照藥典及制備生物制品的標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)出了一批馬抗H7N7精制免疫球蛋白，目前研究人員正在進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)以確定其有效性和安全性。
“大自然總在和我們開玩笑。每次有新發(fā)突發(fā)傳染病來(lái)襲，全國(guó)就如臨大敵，動(dòng)用甚至耗費(fèi)了許多資源。從2003年的SARS冠狀病毒，到幾年前的H5N1，再到去年和今年的H7N9，雖然每次都是不同的"狼來(lái)了"，卻常常是各種輕重武器一起上。我們應(yīng)該通過系統(tǒng)的研究，產(chǎn)生一套類似標(biāo)準(zhǔn)操作流程的臨床應(yīng)急救治應(yīng)對(duì)措施。我期待未來(lái)新發(fā)突發(fā)傳染病來(lái)襲時(shí)，我們的臨床應(yīng)急救治的技術(shù)手段可以更加成熟，最大限度降低重癥及死亡率，應(yīng)對(duì)成本也能降到最低。”陳凌相信，在鐘南山的領(lǐng)導(dǎo)下，H7N9病毒疫苗的成功研發(fā)將指日可待。